嘔吐毒素免疫金標速測卡使用說明書
【產品簡介】
嘔吐毒素(Vomitoxin),是一種單端孢霉烯族毒素,主要由禾谷鐮刀菌和粉紅鐮刀菌產生,化學名稱為脫氧腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),容易存在于各種谷物類糧食及加工產品中,污染水平一般為mg/kg(ppm)級。DON具有很強的細胞毒性。人誤食DON含量高的食物后,容易導致急性中毒頭昏、腹脹、惡心、嘔吐,以及白細胞缺乏癥。
本檢測卡對谷物(小米、玉米、大麥等)及其制品(蛋糕、餅干、面包等)中的DON含量進行快速、定量檢測。不需要任何儀器設備,最低檢測限為100 pbb。
【檢測原理】
嘔吐毒素免疫金標速測卡應用競爭抑制免疫層析的原理,樣本中的嘔吐毒素在側向移動的過程中與膠體金標記的特異性單克隆抗體結合,抑制了抗體和NC膜檢測線上嘔吐毒素-BSA偶聯物的結合。如果樣本中嘔吐毒素含量大于100pbb,檢測線不顯顏色,結果為陽性;反之,檢測線顯紅色,結果為陰性。
【產品組成】
嘔吐毒素免疫金標速測卡(40份/盒);說明書(1份/盒);塑料吸管(40個/盒);
【樣品處理】(稀釋因子為5)
準確稱取1.0 g飼料、谷物、麥芽樣品進行粉碎以使75%的樣品可以通過20目篩,樣品的大小顆粒與速溶咖啡相當。接著將粉碎后的樣品放入三角瓶中,加入5 mL甲醇與水(1:9)的混合液(樣品提取液),振蕩15 min。靜置5min后取上清液進行檢測分析。取考慮不同樣品對嘔吐毒素的最高含量要求,可參考下表在1g樣品中加入樣品提取液的量
樣品允許量(ug/kg) |
200 |
300 |
500 |
800 |
1000 |
1g樣品中加入樣品提取液的量(ml) |
2 |
3 |
5 |
8 |
10 |
稀釋因子 |
2 |
3 |
5 |
8 |
10 |
【使用步驟】
(1)測試前請完整閱讀使用說明書,并將未開封的檢測卡和待檢樣本溶液回復至常溫;
(2)從包裝袋中取出檢測卡后請盡快使用;
(3)將檢測卡平放,用滴管吸取待檢樣品溶液,滴加3滴(約75 μL) 于加樣孔中,加樣后開始計時;
(4)結果應在5-8分鐘讀取,其他時間判讀無效;
(5)讀取結果時,檢測卡水平置于觀察者正面,如下圖所示。
【結果判斷】
? 陰性(-): T線顯色(測試線,靠近加樣孔一端),表明樣品中嘔吐毒素濃度低于檢測線或不含嘔吐毒素殘留。
? 陽性(+): T線無顯色,表明樣品中嘔吐毒素濃度高于檢測線。
? 無效:未出現C線,可能操作不當或檢測卡已失效。在此情況下,應再次仔細閱讀說明書,并用新的檢測卡重新測試。
【注意事項】
⑴請勿觸摸檢測卡中央的白色膜面;請勿使用過期的檢測卡。
⑵本公司提供的滴管請勿重復使用;本公司提供的試劑請勿食用。
⑶若需直接檢測標準品,請用我方提供的PBS緩沖液進行配制。
⑷自來水、蒸餾水或去離子水不能作為陰性對照。
⑸由于樣本的差異,有的檢測線顏色可能偏淡或偏灰,但只要出現條帶,就可判定為陰性結果。
⑹出現陽性結果,建議用本卡復查一次。氣質聯用法是真菌毒素檢測的確證方法。
⑺樣本中的固體雜質顆粒會導致假陽性結果,取樣時棄去肉眼可見的顆粒部分,有條件時請離心后取上清液做檢測。
【特異性】
本產品與黃曲霉毒素、T-2毒素、玉米赤霉烯酮等真菌毒素無交叉反應。
【精密度】
同時用本產品和嘔吐毒素ELISA檢測試劑盒對包括146份陰性樣本和140份陽性樣本的286份樣品進行檢測,結果表明本產品與嘔吐毒素ELISA檢測試劑盒的結果符合率為95.1%。
【儲存及有效期】
原包裝在4-30 ℃陰涼避光干燥處儲存,有效期為12個月,批號和有效期見包裝盒。